PGT-A检测中，如何确保样本无母体DNA污染？

摘要： 　　在PGT-A检测中，为确保样本无母体DNA污染，可以采取以下措施：　　样本采集与处理阶段　　严格去除卵丘细胞：在进行ICSI之前，仔细彻底地去除所有胚胎培养前的卵丘细胞...

　　在PGT-A检测中，为确保样本无母体DNA污染，可以采取以下措施：

　　样本采集与处理阶段

　　严格去除卵丘细胞：在进行ICSI之前，仔细彻底地去除所有胚胎培养前的卵丘细胞，以减少母体污染。

　　避免精子污染：确保去除附着在透明带上的任何额外精子，以减少父源污染的风险。

　　优化胚胎活检技术：提高胚胎活检的准确性和安全性，减少对胚胎的损伤，从而降低因活检操作不当导致的母体DNA污染。

　　去除透明带：通过反复用微量吸管吹打和彻底冲洗囊胚，去除透明带，以排除透明带及其相关的跨带突起作为游离DNA来源的可能性。

　　实验室操作阶段

　　严格实验室操作规范：保持实验室环境清洁，遵循适当的着装程序，对设备进行消毒，以减少污染风险。

　　使用屏障技术：利用物理屏障如层流罩或生物安全柜，防止交叉污染。

　　人员培训：对实验室人员进行彻底的污染控制措施培训，定期培训和意识提升计划有助于保持高度警惕。

　　设置阴性对照：在样本处理过程中始终设置阴性对照，以监测污染情况。

　　数据分析阶段

　　计算DNA甲基化信息：利用DNA甲基化信息，通过计算去污染算法，选择DNA甲基化水平为0的读段，从而减少污染的非胚胎DNA。

　　定量父母污染测试（qPCT）：建立定量父母污染测试，确保更可靠的结果，并验证其对玻璃化常规IVF胚胎的有效性。

　　线粒体DNA分析：通过分析线粒体DNA变异，可以追溯母系血统并唯1识别胚胎，从而检测污染。

　　其他措施

　　优化胚胎培养条件：在胚胎培养过程中，尽量减少对胚胎的干扰，避免不必要的操作，以减少母体DNA的释放。

　　使用新鲜胚胎：与冷冻胚胎相比，新鲜胚胎的母体DNA污染比例显著降低。

　　通过以上措施的综合应用，可以有效降低PGT-A检测中母体DNA污染的风险，提高检测结果的准确性和可靠性。