上篇我们讨论了短时授精+早补救ICSI，可以解决大部分精卵不结合的问题。本篇继续讨论影响短时授精+早补救ICSI的限制因素，以及晚补救ICSI在一些特殊情况下的应用。
短时授精+早补救ICSI的受精率都高吗？
大量的研究表明，大部分的短时授精+早补救ICSI结果是令人满意的，但仍有极少部分患者无法获得满意的受精率，这部分患者通常会非常不解。“我不是做补救了嘛，为什么受精率仍然不好？”，或者“我受精这么差，为什么早不做补救呢？”
受精是人类*殖中一个很复杂的环节，作为一项技术，补救ICSI并不能解决所有的受精问题，那么，下面我们就来看一下这项技术的局限性。由于加精后4-6小时仅仅通过观察上述间接判断卵子受精的几项指标，好比“雾里看花”，并不一定能做到完全判断准确，常见影响因素有以下几点：
第一，未受精的卵子本身存在极体形态不典型或极体碎裂或异常，排出≥2个“极体”，难以判断真的是排出了第二极体；
第二，卵子们排出第二极体的时间并不非常一致，业内公认的观察时间窗4-6小时是通过大量数据得出的，只是大部分卵子符合这个时间窗，但存在个体差异，部分卵子可能因成熟度差异，导致无法排除窗口期卵子已经受精但第二极体尚未排出的情况；
第三，即使正确判断了极体情况，因卵子激活障碍，或*缺陷等其他原因导致的精卵结合障碍，行补救ICSI仍然不能解决受精问题。
【试管婴儿移植后躺多久】
【做二代试管婴儿的流程】（图：成熟的未受精卵子）
另外，一些情况不适合做早补救ICSI。比如，因卵子异常或不熟导致的受精率差。此外，一些情况需谨慎做补救ICSI。比如，卵子数≤3枚或有第二极体排出的卵子≥30%，行早补救ICSI技术风险较大，一来这项技术本身对卵子是有创的，二来卵子数少容易补错，另外，这项技术是一次性收费的，补救卵子数过少，性价比低，增加患者经济负担。
是不是“晚补救ICSI”就没有用武之地了呢？
当然不是。在一些特殊情况下，也需要晚补救。比如，加精后4-6小时拆除卵子周围的颗粒细胞后，观察到卵子不熟或成熟率低下，此时行ICSI仍未到时机，胚胎师会视情况延迟至取卵后的第二天早上，再对成熟的未受精的卵子进行晚补救ICSI。
这部分卵子由于授精时间比常规时间推后大半天，后期的胚胎发育速度也比常规的慢一些，到第三天一般才长到3-6细胞，导致胚胎评分低，因此建议将胚胎行囊胚培养，观察到第七天，冷冻后到下一个冻胚周期再用。
在我们*殖中心，取卵日不熟的卵子通过培养一晚，成熟后再行晚补救ICSI，也能得到很好的胚胎，形成优质的囊胚。这种方法能改善不成熟卵子的受精率和胚胎结局。
还有一种情况会行晚补救ICSI，当卵子极体碎裂，或未受精的卵子异常排出两个“极体”，胚胎师到了第二天却没观察到原核。这种情况下，会行晚补救ICSI，但大部分卵子错过了最佳受精时间而导致胚胎质量不佳。但是如果不补救，结局可能会更差。
（图：加精后4-6小时第二极体不确定，次日观察未受精的卵子）
综合以上情况，我们可以看到短时授精+早补救ICSI确实可以解决大部分患者的问题，避免受精失败给他们带来的损失和打击。但是它并不是万能的，也有其局限性。而晚补救ICSI对特殊病例也发挥着重要作用。
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